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瓊脂糖
產品貨號:A2015
產品規(guī)格:100 g
儲存條件:室溫保存,有效期見外包裝。
產品介紹:Agarose 即瓊脂糖,不含 DNase、RNase 和 Protease。常用于配制核酸分析凝膠,例如用于 DNA 或 RNA 電泳的瓊脂糖 凝膠等。常使用 TAE 或 TBE 作為電泳液。瓊脂糖凝膠的濃度和 DNA 電泳的分辨率及理想的電泳液參考下表。對于分辨率 要求不高時,使用 TAE (Tris-乙酸 EDTA 緩沖液)和 TBE (Tris-硼酸 EDTA 緩沖液)均可;對于分辨率要求比較高時,較低濃 度的膠有利于提高大分子量核酸的分辨率,此時宜使用 TAE;而較高濃度的膠有利于提高小分子量核酸的分辨率,此時宜使用TBE。
膠濃度(w/v) | 理想分離范圍 | 理想的電泳液 |
0.8% | 800-22,000 bp | TAE |
1.0% | 500-10,000 bp | TAE/TBE |
1.2% | 400-7,000 bp | TAE/TBE |
1.5% | 250-5,000 bp | TAE/TBE |
2.0% | 150-3,000 bp | TBE |
使用方法:
1. 根據(jù)電泳需要,配置合適濃度的電泳及制膠緩沖液。 注:用于電泳的緩沖液和用于制膠的緩沖液必須是相同的。 2. 根據(jù)制膠量及凝膠濃度,在加有一定量的電泳緩沖液的三角錐瓶中,加入準確稱量的瓊脂糖粉(總液體量不宜超過三角 錐瓶的 50%容量)。 3. 在微波爐中加熱溶解瓊脂糖,設置高火加熱至沸騰,保持膠液沸騰約 30 s,戴上防熱手套,移開三角錐瓶,小心搖動 三角錐瓶,重懸未溶解顆粒,再次用高火加熱 10-30 s,或直至瓊脂糖溶解。請戴上防熱手套,小心搖動三角錐瓶,使瓊 脂糖膠液充分均勻。 注:必須保證瓊脂糖充分溶解,此時瓊脂糖膠液清澈,否則,會造成電泳圖像模糊不清。加熱時如膠液劇烈沸騰發(fā)泡,停 止加熱。微波爐中加熱時間不宜過長。 4. 根據(jù)實驗需要,加入一定量的核酸電泳染料,并充分混勻。 注:推薦使用我公司推出的 GelstainRedTM,Super GelBlueTM 安全無毒核酸凝膠電泳染料。5. 將瓊脂糖溶液倒入制膠模中,然后在適當位置處插上梳子。凝膠厚度一般在 3-5 mm 之間。 6. 在室溫下使膠凝固(大約 30 min-1 h),然后放置于電泳槽中進行電泳。 注:凝膠不立即使用時,請用保鮮膜將凝膠包好后在 4℃下保存,一般可保存 2~5 天。
質量控制:凝膠強度(1%):> 1200 g/cm2; 電滲(EEO):< 0.15; 硫化物:≤ 0.15%; 凝膠溫度(1.5%凝膠):35~37℃; 熔膠溫度(1.5%凝膠):87~89℃; 水分:≤ 10%;
核酸酶不得檢出