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簡要描述:大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞收到后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
產(chǎn)品型號(hào): 1ml/株
所屬分類:大鼠原代細(xì)胞
更新時(shí)間:2016-01-18
大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)條件:DMEM(高糖)+10%FBS,傳代方法:按1:3傳代,凍存條件:90%FBS+10%DMSO,規(guī)格:25T,產(chǎn)品復(fù)蘇率:60培養(yǎng)兩天就能清晰看到軸突與樹突,培養(yǎng)時(shí)間可長達(dá)13-16天,質(zhì)量控制:嚴(yán)格經(jīng)過了細(xì)菌、真菌、霉菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體檢測,產(chǎn)品庫存:現(xiàn)貨供應(yīng)。
大鼠腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞具體操作:
1).首先不加*,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為*步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。
2).然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面*消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)*的敏感度了。)
3).吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的*潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的*消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉*與干凈彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對(duì)比。)這是第三步。
4).然后把前面剛吸出來的*重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的*,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候,吸掉*,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況你自己把握)。這是第四步。
其實(shí)還可以有第五步,對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)*特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能zui大限度地將*對(duì)細(xì)胞的損傷降到zui低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠*。
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