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細胞培養(yǎng)板作為培養(yǎng)細胞的一種常用和重要的工具,依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細胞培養(yǎng)板,形狀、規(guī)格、用途多樣,那么如何選擇適合的培養(yǎng)板?
1.細胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型)
不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途。培養(yǎng)細胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養(yǎng)液面高度相對一致。因此做MTT等實驗時,無論是貼壁和懸浮細胞,一般選用平底板。測吸光值一定要使用平底的培養(yǎng)板。要特別注意材質(zhì), 標(biāo)示“Tissue Culture (TC) Treated"是養(yǎng)細胞用的。
U型或V型板,一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學(xué)方面,當(dāng)做兩種不同淋巴細胞混合培養(yǎng)時,需要二者相互接觸刺激,這時一般會選用U型板,因為細胞會由于重力的作用而聚集在很小的范圍內(nèi)內(nèi)。圓底培養(yǎng)板還會用于同位素摻入的實驗,需要用細胞收集儀收集細胞的培養(yǎng),如“混合淋巴細胞培養(yǎng)"等。V型板常用做細胞殺傷、免疫學(xué)血凝集實驗。細胞殺傷這種實驗也可用U型板替代(加入細胞后,低速離心)。
2.培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536 孔等
大多數(shù)用戶在組織培養(yǎng)瓶上開始組織培養(yǎng)。不過,許多應(yīng)用也需要多孔板。理想的數(shù)量嘛,取決于你所需的通量水平,以及是否有機器人的協(xié)助。completely手動地向96孔板中添加試劑,這并非不可行,但有電動移液器或機器人的幫助當(dāng)然更好。擴展到384孔板,就更加需要機器人,而1536孔板更是絕對需要。當(dāng)然,高密度多孔板的挑戰(zhàn)還在于分析小型化。
3. 微孔板的顏色
多孔板的顏色也與應(yīng)用息息相關(guān)。如果用相差顯微鏡或肉眼觀察細胞,可選擇透明的多孔板。不過,對于可見光光譜以外的應(yīng)用(如冷光或熒光),有顏色的多孔板(如白色或黑色)則是必需的。在使用從頂部讀數(shù)的儀器時,底部應(yīng)該是不透明的,而使用顯微鏡或底部讀數(shù)的儀器時,應(yīng)選擇底部透明的多孔板。冷光樣品通常選擇白色表面,以便最大限度提高信號的反射率,而大于300 nm的熒光應(yīng)用通常使用黑色表面,以吸收激發(fā)信號。有顏色的表面還可以防止相鄰孔之間的信號串?dāng)_。
4. 表面處理
選擇哪種細胞表面處理,這要取決于你培養(yǎng)的是懸浮細胞還是貼壁細胞。對于懸浮或球體細胞培養(yǎng),建議使用BRAND inertGrade™微孔板,它經(jīng)過patent的疏水凝膠處理,可抑制細胞或蛋白附著。對于輕松附著的貼壁細胞(如HeLa),標(biāo)準(zhǔn)的組織培養(yǎng)表面就足夠了。對于那些貼壁有困難的細胞(如原代細胞),或涉及到嚴(yán)格洗滌的應(yīng)用,建議使用BRAND的cellGrade™微孔板。這種unique的表面與多聚賴氨酸處理的表面相似,但它不是涂層,而是塑料性質(zhì)的物理變化,因此不需要冷藏。對于那些敏感細胞或血清量減少的細胞,建議使用cellGrade™ plus表面。
5.根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細胞培養(yǎng)板
Terasaki plate主要是用于晶體學(xué)研究,產(chǎn)品設(shè)計便于對晶體的觀察與結(jié)構(gòu)分析。有兩種sitting 和handing drop兩種方法,兩種方法應(yīng)用產(chǎn)品的外形結(jié)構(gòu)也不同。材料上選擇crystal class polymer ,特殊的材料有利觀察晶體結(jié)構(gòu)。細胞培養(yǎng)板主要是PS材料,材料是treated sufface,便于細胞貼壁生長與伸展。當(dāng)然還有浮游細胞的生長材料,同時還有l(wèi)ow binding surface。
具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗?zāi)康亩ā?/span>
平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇
1.貼壁細胞一般用平底培養(yǎng)板。
2.懸浮型細胞的培養(yǎng)一般用V型。
3.U型培養(yǎng)板亦多用于培養(yǎng)懸浮型細胞 。
4.V型培養(yǎng)板有時用做免疫學(xué)血凝集的實驗。
酶標(biāo)板一般要比細胞培養(yǎng)板貴,細胞板主要做細胞培養(yǎng),也可以用來測蛋白濃度;酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板,一般不用做細胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測,需要更高的要求和特定的酶標(biāo)工作液。常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范圍,結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。
平底的什么類型的細胞都可用,但當(dāng)細胞數(shù)目較少,如做克隆時,就用96孔平底板。
另外﹐做MTT等實驗時,無論貼壁和懸浮細胞,一般均用平底板。
問題1:培養(yǎng)板有4、6、12、24、48、96孔幾種規(guī)格 ,但不知道到底什么實驗用哪種規(guī)格?
答:要根據(jù)具體的實驗要求,流式一般用6孔,MTT一般用96孔,細胞爬片一般用24孔等!要具體根據(jù)實驗來定。
問題2:請問Terasaki板與普通細胞培養(yǎng)板有什么區(qū)別?
答:Terasaki plate主要是用于晶體學(xué)研究,產(chǎn)品設(shè)計便于對晶體的觀察與結(jié)構(gòu)分析。
有兩種sitting 和handing drop兩種方法,兩種方法應(yīng)用產(chǎn)品的外形結(jié)構(gòu)也不同。
材料上選擇crystal class polymer ,特殊的材料有利觀察晶體結(jié)構(gòu)。
細胞培養(yǎng)板主要是PS材料。材料是treated sufface。便于細胞貼壁生長與伸展。當(dāng)然還有浮游細胞的生長材料,同時還有l(wèi)ow binding surface,有關(guān)更多實驗材料上的應(yīng)用與對材料的選擇。
問題3:想測吸光度用酶標(biāo)儀,用多孔細胞培養(yǎng)板行嗎?請問酶標(biāo)板多孔細胞培養(yǎng)板有什么區(qū)別?
答:用多空細胞培養(yǎng)板測吸光度肯定可以拉,我們經(jīng)常用它來做樣品的蛋白定量和MTT檢測。
區(qū)別:酶標(biāo)板一般要比細胞培養(yǎng)板貴,細胞板主要做細胞培養(yǎng),但也可以用來測蛋白濃度;酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板,一般不能用做細胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測,它需要更高的要求還需要特定的酶標(biāo)工作液。
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